Methylcellulose-Based Media for CFC Assays

    ColonyGEL CFC Assays


    Human  |  Mouse  |  Rat  |  Non-Human Primate  |  Canine



    ColonyGEL™ methylcellulose-based media is optimized for the differentiation and enumeration of myeloid, erythroid and mixed-lineage hematopoietic progenitors from bone marrow, cord blood, mobilized peripheral blood, peripheral blood, mouse fetal liver and mouse spleen cells. Enriched cell populations such as CD34+ and  CD133+ cells can also be used in ColonyGEL™ media.

    Using only the highest quality , pre-screened components, ColonyGEL™ is guaranteed to meet or exceed the performance of the current gold standard media (Table l). ColonyGEL™ combines uncompromising quality and performance with GREAT value.


    ColonyGEL™ Performance Meets or Exceeds the Gold Standard

    Meets or Exceeds

    Table 1. CFC assays were initiated in a methylcellulose-based medium containing rh-lL-3, rh-GM-C SF, rh-SCF and Epo and using cells derived from normal human bone marrow (2 x 104/culture ) , cord blood (l x 104/ culture) and  mobilized peripheral blood (5 x l 04 / culture). Erythroid (BFU-E) , myeloid (CFU-GM) and multi-potential (CFU-GEMM) progenitors were enumerated following 14 days in culture.

    *ND - None Detected. Colonies derived from CFU-E are not typically found in cord blood and mobilized peripheral blood. CFU-GEMM -derived colonies are extremely rare and there fore , may not be detected.

    Colony Identification

    COLONY TYPE       DEFINITION                                                                                                                                                                                                                                                      

         CFU-GM                    Colony-Forming Unit - Granulocyte Macrophage is capable of production colonies with 40 or more granulocyte-monocyte and/or macrophage cells

         CFU-G                       Colony-Forming Unit - Granulocyte produces a colony with >40 granulocytes

         CFU-M                       Colony-Forming Unit Macrophage produces a colony with >40 macrophages

         BFU-E                        This Burst-Forming Unit - Erythroid colony-forming cell is considered to be more primitive, generating larger colonies

         CFU-E                        Colony-Forming Unit - Erythroid is an erythroid progenitor that produces a colony containing 1 or 2 clusters of 8-200 erythroblasts. CFU-E progenitors are less                                          primitive, have lower prolierate potential and therefore, colonies are generally small when compared to colonies derived from BFU-E.

         CFU-GEMM               Colony-Forming Unit - Granulocyte Erythroid Macrophage Megakaryocyte mixed-lineage colony-forming cell generates very large colonies containing >200                                              erythroid cells and >20 myeloid cells

         CFU-MM                     Colony-Forming Unit - Multiple Myeloid Leukemic Progenitors producing a range of colony numbers.  Confirmation through surface phenotype (plucked                                                    Colonies) CD138+ (multiple myeloma)


    Recommended Plating Concentration for Human and Mouse Cells1

    HUMAN CELLS                                                                                                    MOUSE CELLS                                                                                                                                                  

    Cell Source                                                   Cells per 35 mm Dish                       Cell Source                                                              Cells per 35 mm Dish*

         Bone Marrow (NH4Cl Treated)                                2 x 104                                         Bone Marrow (Untreated)                                       2 x 104

         Bone Marrow (Light Density)                                   1 x 104                                         Spleen (NH4Cl Treated)                                         2 x 105

         Bone Marrow CD34+ Enriched                                500                                              Peripheral Blood (NH4Cl Treated)                          3 x 105

         Bone Marrow CD133+ Enriched                              250                                              Day 14 Fetal Liver                                                   2 x 104

         Fresh Cord Blood (Unprocessed)                            3 x 104                                        *Plating concentrations may vary depending on mouse strain

         Frozen Cord Blood (Unprocessed)                          5 x 10                            

         Cord Blood CD34+ Enriched                                   500

         Cord Blood CD133+ Enriched                                 250

         Mobilized Peripheral Blood (normal donor)             2 - 5 x 104

         Mobilized Peripheral Blood CD34+ (Enriched)        500

         Mobilized Peripheral Blood CD133+ Cells              250

         Peripheral Blood (Light Density)                              1 x 105


    ColonyGELTM Product List

    CATALOG #                      PRODUCT DESCRIPTION                                                                        UNIT SIZE                                                                                                                            

          1100                                       ColonyGELTM 1100 - Stock Methylcellulose Medium                            100 mL


         1101                                        ColonyGELTM 1101 - Base Medium                                                        90 mL

         1102                                        ColonyGELTM 1102 - Complete Medium                                               100 mL

         1103                                        ColonyGELTM 1103 - Complete Medium without Epo                           100 mL

         1104                                        ColonyGELTM 1104 - High Cytokine Formulation                                  100 mL

         1150                                        ColonyGELTM 1150 - Multiple Myeloma CFC Medium                          100 mL


         1201                                        ColonyGELTM 1201 - Base Medium                                                        90 mL

         1202                                        ColonyGELTM 1202 - Complete Medium                                               100 mL

         1203                                        ColonyGELTM 1203 - Complete Medium without Epo                           100 mL

         1205                                        ColonyGELTM 1205 - Pre-B Cell Medium                                              100 mL


         1301                                        ColonyGELTM 1301 - Base Medium                                                        90 mL

         1303                                        ColonyGELTM 1303 - Complete Medium without Epo                           100 mL


         1401                                        ColonyGELTM 1401 - Base Medium                                                       90 mL

         1402                                        ColonyGELTM 1402 - Complete Medium                                              100 mL

         1403                                        ColonyGELTM 1403 - Complete Medium without Epo                          100 mL


         1501                                        ColonyGELTM 1501 - Base Medium                                                      90 mL

         1503                                        ColonyGELTM 1503 - Complete Medium without Epo                         100 mL


         3011                                         Blunt End Needles                                                                               Pkg of 25