Methylcellulose-Based Media for CFC Assays

Human  |  Mouse  |  Rat  |  Non-Human Primate  |  Canine

ColonyGEL™ methylcellulose-based media is optimized for the differentiation and enumeration of myeloid, erythroid and mixed-lineage hematopoietic progenitors from bone marrow, cord blood, mobilized peripheral blood, peripheral blood, mouse fetal liver and mouse spleen cells. Enriched cell populations such as CD34+ and  CD133+ cells can also be used in ColonyGEL™ media.

Using only the highest quality , pre-screened components, ColonyGEL™ is guaranteed to meet or exceed the performance of the current gold standard media (Table l). ColonyGEL™ combines uncompromising quality and performance with GREAT value.

ColonyGEL™ Performance Meets or Exceeds the Gold Standard

Table 1. CFC assays were initiated in a methylcellulose-based medium containing rh-lL-3, rh-GM-C SF, rh-SCF and Epo and using cells derived from normal human bone marrow (2 x 10⁴/culture ) , cord blood (l x 10⁴/ culture) and  mobilized peripheral blood (5 x l 04 / culture). Erythroid (BFU-E) , myeloid (CFU-GM) and multi-potential (CFU-GEMM) progenitors were enumerated following 14 days in culture.

*ND - None Detected. Colonies derived from CFU-E are not typically found in cord blood and mobilized peripheral blood. CFU-GEMM -derived colonies are extremely rare and there fore , may not be detected.

Colony Identification

     CFU-GM                    Colony-Forming Unit - Granulocyte Macrophage is capable of production colonies with 40 or more granulocyte-monocyte and/or macrophage cells

     CFU-G                       Colony-Forming Unit - Granulocyte produces a colony with >40 granulocytes

     CFU-M                       Colony-Forming Unit Macrophage produces a colony with >40 macrophages

     BFU-E                        This Burst-Forming Unit - Erythroid colony-forming cell is considered to be more primitive, generating larger colonies

     CFU-E                        Colony-Forming Unit - Erythroid is an erythroid progenitor that produces a colony containing 1 or 2 clusters of 8-200 erythroblasts. CFU-E progenitors are less                                          primitive, have lower prolierate potential and therefore, colonies are generally small when compared to colonies derived from BFU-E.

     CFU-GEMM               Colony-Forming Unit - Granulocyte Erythroid Macrophage Megakaryocyte mixed-lineage colony-forming cell generates very large colonies containing >200                                              erythroid cells and >20 myeloid cells

     CFU-MM                     Colony-Forming Unit - Multiple Myeloid Leukemic Progenitors producing a range of colony numbers.  Confirmation through surface phenotype (plucked                                                    Colonies) CD138+ (multiple myeloma)

Recommended Plating Concentration for Human and Mouse Cells¹

Cell Source                                                   Cells per 35 mm Dish                       Cell Source                                                              Cells per 35 mm Dish*

     Bone Marrow (NH₄Cl Treated)                                2 x 10⁴                                         Bone Marrow (Untreated)                                       2 x 10⁴

     Bone Marrow (Light Density)                                   1 x 10⁴                                         Spleen (NH₄Cl Treated)                                         2 x 10⁵

     Bone Marrow CD34+ Enriched                                500                                              Peripheral Blood (NH₄Cl Treated)                          3 x 10⁵

     Bone Marrow CD133+ Enriched                              250                                              Day 14 Fetal Liver                                                   2 x 10⁴

     Fresh Cord Blood (Unprocessed)                            3 x 10⁴                                        *Plating concentrations may vary depending on mouse strain

     Frozen Cord Blood (Unprocessed)                          5 x 10⁴                             

     Cord Blood CD34+ Enriched                                   500

     Cord Blood CD133+ Enriched                                 250

     Mobilized Peripheral Blood (normal donor)             2 - 5 x 10⁴

     Mobilized Peripheral Blood CD34+ (Enriched)        500

     Mobilized Peripheral Blood CD133+ Cells              250

     Peripheral Blood (Light Density)                              1 x 10⁵

ColonyGEL^TM Product List

      1100                                       ColonyGEL^TM 1100 - Stock Methylcellulose Medium                            100 mL

HUMAN

     1101                                        ColonyGEL^TM 1101 - Base Medium                                                        90 mL

     1102                                        ColonyGEL^TM 1102 - Complete Medium                                               100 mL

     1103                                        ColonyGEL^TM 1103 - Complete Medium without Epo                           100 mL

     1104                                        ColonyGEL^TM 1104 - High Cytokine Formulation                                  100 mL

     1150                                        ColonyGEL^TM 1150 - Multiple Myeloma CFC Medium                          100 mL

MOUSE

     1201                                        ColonyGEL^TM 1201 - Base Medium                                                        90 mL

     1202                                        ColonyGEL^TM 1202 - Complete Medium                                               100 mL

     1203                                        ColonyGEL^TM 1203 - Complete Medium without Epo                           100 mL

     1205                                        ColonyGEL^TM 1205 - Pre-B Cell Medium                                              100 mL

RAT

     1301                                        ColonyGEL^TM 1301 - Base Medium                                                        90 mL

     1303                                        ColonyGEL^TM 1303 - Complete Medium without Epo                           100 mL

NON-HUMAN PRIMATE

     1401                                        ColonyGEL^TM 1401 - Base Medium                                                       90 mL

     1402                                        ColonyGEL^TM 1402 - Complete Medium                                              100 mL

     1403                                        ColonyGEL^TM 1403 - Complete Medium without Epo                          100 mL

CANINE

     1501                                        ColonyGEL^TM 1501 - Base Medium                                                      90 mL

     1503                                        ColonyGEL^TM 1503 - Complete Medium without Epo                         100 mL

ACCESSORY PRODUCTS

     3011                                         Blunt End Needles                                                                               Pkg of 25